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JM1966-794477 
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Ｓａｎｇｅｒ測序，也稱為雙脫氧鏈終止法（Ｄｉｄｅｏｘｙ Ｃｈａｉｎ Ｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ Ｍｅｔｈｏｄ），是由Ｆｒｅｄｅｒｉｃｋ Ｓａｎｇｅｒ及其同事在１９７７年開發(fā)的***種用于確定ＤＮＡ序列的方法。盡管這種方法已經(jīng)被高通量測序技術(shù)部分取代，但它仍然被廣泛應(yīng)用于小規(guī)模的基因測序、驗(yàn)證下***代測序（ＮＧＳ）結(jié)果以及克隆質(zhì)粒等場景中。
傳統(tǒng)的Ｓａｎｇｅｒ測序過程涉及以下幾個步驟：
ＰＣＲ擴(kuò)增：***先，目標(biāo)ＤＮＡ片段需要與引物***起進(jìn)行ＰＣＲ擴(kuò)增。
鏈終止反應(yīng)：接下來，在四個獨(dú)立的反應(yīng)體系中分別加入***定比例的四種常規(guī)脫氧核苷酸（ｄＮＴＰｓ）和***種標(biāo)記了熒光染料或放射性同位素的雙脫氧核苷酸（ｄｄＮＴＰｓ），每種反應(yīng)體系包含不同的ｄｄＮＴＰ。當(dāng)***個ｄｄＮＴＰ被聚合酶添加到正在生長的ＤＮＡ鏈上時，該鏈的增長就會停止，因?yàn)槿鄙伲常В希然鶊F(tuán)。
電泳分離：隨后，所有反應(yīng)產(chǎn)物混合后通過聚丙烯酰胺凝膠電泳（ＰＡＧＥ）或毛細(xì)管電泳根據(jù)大小分離這些不同長度的ＤＮＡ片段。 上海聚慕醫(yī)療器械公司提供醫(yī)療器械采購，維修保養(yǎng)，安裝培訓(xùn)，出租租賃等，來電咨：18901912755 郵箱 :ｐｏｓｔｍａｓｔｅｒ＠ｊｍｍｅｄｉｃａｌ．ｃｎ
讀取序列：***后，通過檢測每個片段末端標(biāo)記的信號來確定其對應(yīng)的堿基類型，并由此推斷原始ＤＮＡ模板的序列。
現(xiàn)代的Ｓａｎｇｅｒ測序儀，如Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ公司的３５００系列遺傳分析儀，已經(jīng)實(shí)現(xiàn)了自動化操作流程，包括自動進(jìn)樣、電泳、數(shù)據(jù)收集和初步分析。
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